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      產品詳情
      • 產品名稱:細胞總膽固醇菲律賓FILIPIN熒光染色試劑盒

      • 產品型號:
      • 產品廠商:其它品牌
      • 產品文檔:
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      簡單介紹:
      細胞總膽固醇(酯酶法)菲律賓(FILIPIN)熒光染色試劑盒 細胞總膽固醇(酯酶法)菲律賓(FILIPIN)熒光染色試劑是一種旨在通過使用膽固醇酯酶和熒光染料菲律賓(FILIPIN)特異性與膽固醇結合,形成復合體,并產生藍色熒光現象,以此檢測總膽固醇的權威而經典的技術方法。該技術經過精心改良、成功實驗證明的。主要適用于各種細胞(動物、人體等) 或培養細胞中總膽固醇分布的檢測。廣泛用于細胞病理生理的研究。產品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷, 性能穩定,熒光清晰。
      詳情介紹:

      技術背景


      膽固醇cholesterol是一類稱之為固醇類sterols或聚類異戊二烯polyisoprenoid或三萜皂甙元triterpene的多環化合物polycyclic compound。其分子式為 cholest-5-en-3β-ol。膽固醇以游離free form和脂化結合(ester)兩種形式廣泛存在于所有動物組織中,主要以非脂化形式存在于細胞膜中。在膜功能和脂代謝以及**合成中起著重要作用。菲律賓FILIPIN是一類由四種同分異構體的多烯***polyene antibiotics)或多馬霉素(polyene macrolide的總稱。源自于 S. FILIPINENSIS **的培養液中。其分子式 C35H58O11,分子量為 654.8。首先在膽固醇酯酶cholesterol esterase的水解下,酯化膽固醇cholesterel ester)轉化為游離膽固醇,然后使用菲律賓與所有游離膽固醇結合形成聚集體或復合物,產生熒光。


      產品內容



      清理液(Reagent A


      40 毫升

      固著液(Reagent B

      4 毫升

      水解液(Reagent C

      4 毫升

      抗干擾液(Reagent D

      4 毫升

      染色液(Reagent E

      2 毫升

      產品說明書

      1


      保存方式




      保存水解液(Reagent C)和  染色液(Reagent E)在-20℃冰箱里,避免光照; 其余的保存在 4℃冰箱里;有效保證 6


      用戶自備


      熒光顯微鏡:用于樣品染色后觀察分析




      實驗步驟



      一、 樣本固著處理



      1. 準備 48 孔細胞培養板的細胞或載波片的細胞
      2. 小心抽去 48 孔細胞培養板里的培養液
      3. 小心加入 200 微升  清理液Reagent A,鋪滿整個樣品表面

      4. 小心移去  清理液(Reagent A

      1. 重復實驗步驟 4 二次
      2. 小心加入 200 微升  固著液Reagent B,鋪滿整個樣品表面
      3. 室溫下孵育 30 分鐘

      8. 小心移去 固著液(Reagent B

      1. 小心加入 200 微升  清理液Reagent A,清洗樣品表面

      10. 小心移去清理液(Reagent A

      1. 重復實驗步驟 10 二次二、樣本染色處理
      1. 小心加入 200 微升 水解液Reagent C,鋪滿整個樣品表面
      2. 室溫下孵育 1 小時(注意:可以延長至 4 小時,避免干枯)

      3. 小心移去水解液(Reagent C

      1. 小心加入 200 微升清理液Reagent A,清洗樣品表面

      5. 小心移去清理液(Reagent A

      1. 重復實驗步驟 5 一次
      2. 小心加入 200 微升抗干擾液Reagent D,鋪滿整個樣品表面
      3. 室溫下孵育 10 分鐘

      9. 小心移去抗干擾液(Reagent D

      1. 小心加入 100 微升染色液Reagent E,鋪滿整個樣品表面
      2. 室溫下孵育 30 分鐘,避免光照

      12. 小心移去染色液(Reagent E

      1. 小心加入 200 微升  清理液Reagent A,清洗樣品表面

      14. 小心移去清理液(Reagent A

      1. 重復實驗步驟 13  14 二次
      2. 小心加入 100 微升清理液(Reagent A
      3. 即刻在熒光顯微鏡下觀察:激發波長:340nm;散發波長:430nm――膽固醇陽性呈現藍色熒光


      注意事項


      1. 本產品為 20 次(48 孔細胞培養板)操作
      2. 操作時,須戴手套
      3. 操作時,避免污染母液
      4. 試劑溶液在樣品表面時,避免有氣泡存在,同時確保鋪滿樣品表面
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      注:1.可以使用快捷鍵Alt+S或Ctrl+Enter發送信息!
      2.如有必要,請您留下您的詳細聯系方式!
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